【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？


操作环境 洁净度：微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 洁净度定期检测:单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌、和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

●细菌培养温度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培养温度:23（25）～28℃。 控制菌培养温度:35～37℃ ●结果报告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 为单位报告。

抽样量 ：随机抽取不少于检验量（两个以上最小包装单位）的3倍。 ● 检验量：一次试验所用的供试品的量。一般为10g或10ml；中药膜剂50 cm2，化学药膜剂为100cm2；贵重或微量包装的药品酌减（不得少于3g）。 ●检查沙门菌的供试品其检验量改为10g或10ml。从2个包装以上取样。

表面活性剂、中和剂或灭活剂：应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。 ● 供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。 ● 供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。 ● 供试液的体积：100ml。

供试品分类 液体供试品 固体、半固体或黏稠液性供试品 需用特殊供试液制备方法的供试品 非水溶性供试品 膜剂供试品 肠溶及结肠溶制剂供试品 气雾剂、喷雾剂供试品 具抑菌活性的供试品


一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。 

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。 


1、瓶装液体样品的处理 :用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。

2、盒装或软塑料包装样品的处理 :将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

固体样品的处理：1、捣碎均质法 ;将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。

整粒振摇法 :直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。


三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。 

四、微生物检验员证书培训相关


校准 用蒸馏水清洗电极，配好缓冲溶液（或购买）。 用洁净的滤纸吸去电极上面附着的水（注意不能擦拭）。 然后将电极放入PH=7的标准缓冲溶液中，将功能选择开关拨到"TEMP"处，旋转温度补偿器旋钮调整温度值与被测溶液温度相同。 将功能选择开关拨到"PH"位，调节"定位"电位器，使显示值与PH=7标准缓冲液当前温度下的标准值一致（PH=7）。 取出电极，用蒸馏水清洗电极，用洁净的滤纸吸去电极上的水，再放入PH=4的标准缓冲溶液中，调节"斜率"电位器使显示值与PH=4标准溶液在当前温度下的标准值一致(PH=4)。 如需要提高定位精度，可反复进行上述标定步骤2-3次，直到显示值符合两个标准缓冲溶液PH值为止。经标定后的"定位"，"斜率"电位器不得再变动。

未知溶液的测定 仪器标定后，可进行未知溶液PH值的测量。 将电极用蒸馏水清洗干净，用滤纸吸去电极上的水。 将电极放入待测溶液，显示的值为未知溶液的PH值。 如果测量时的溶液温度与标定温度不一致，则需要重新进行温度补偿设置，使设置温度与测量时溶液温度相同，斜率和定位器按钮不必再变动。 测量完毕后用清水洗电极，而后关闭电源，套上电极帽。


五、微生物检验员证书相关

化验室常用检测设备 ：阿贝折光仪

校正和保养
标尺零点校正：用已知折射率的标准液体，常用纯水；
若光学零件表面有灰尘，可用脱脂棉轻擦，再用洗耳球吹去；
若有油污，可用脱脂棉蘸少许汽油轻擦后再用乙醚擦干净；
用完后将仪器放入有干燥剂的箱内，放置于干燥、空气流通的室内，防止仪器受潮；
搬动仪器时应避免强烈振动和撞击，防止光学零件损伤而影响精度。



非水溶性供试品 ：增加"十四烷酸异丙酯法"（如油溶膏剂等） 。 ●结肠溶制剂供试品 ：用pH7.6无菌磷酸盐 缓冲液溶解。 ●气雾剂、喷雾剂供试品：冷冻1小时，放尽抛射剂，药液加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨B.S。 ● 具抑菌活性的供试品：增加方法的可操作 性（细化）。

培养基及稀释剂等灭菌:采用验证合格 的灭菌程序进行灭菌。

稀释剂：pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲溶液（增 加检出率，对被破坏的微生物有复 苏作用） pH6.8无菌磷酸盐缓冲液 pH7.6无菌磷酸盐缓冲液

培养时间:必要时，可适当延长培养时间至5～7天 . ●点计：逐日点计. ●同稀释级两个平板的菌落平均数不小于15时，则两个平板菌落数不能相差1倍或以上。 ●培养基平板上生长特殊菌落：以菌落数高的培养基中的菌数为记数结果。 ●菌数报告规则：（1）、（2）、（3）、（4）。


食品微生物学检验的指标 ：食品微生物学检验的指标：细菌菌落总数是反映食品的新鲜度、被细菌污染的程度及在加工过程中细菌繁殖动态的一项指标，是判断食品卫生质量的重要依据。 

2．大肠菌群数：大肠菌群是肠道中普遍存在且数量最多的一群细菌，常将其作为人畜粪便污染的指标，也是评价食品卫生质量的重要依据。
3．致病菌：致病菌的种类繁多、特性各异，一般根据不同食品或不同场合选择不同的致病菌进行检验。
  当某种病流行时，则有必要选检引起该病的病原菌
4、有些霉菌也会产生毒素，从而引起疾病，故也要根据具体情况对霉菌进行检验，  如：黄曲霉菌代谢产生的
黄曲霉毒素能诱发肝癌。








微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/13 9:33:23